CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种广泛应用于细胞活性检测的试剂盒，其核心原理基于WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯)-5-[(4-硝基苯)磺酰]-3-(4-磺酸基)-2H-四唑𬭩内盐）在细胞代谢过程中被还原为水溶性甲臜（Formazan）的化学反应。这一过程与细胞的线粒体脱氢酶活性密切相关，从而能够反映细胞的增殖能力和存活状态。
CCK-8实验的基本流程包括细胞培养、药物处理或刺激、加入CCK-8试剂以及后续的光谱测定。在实验中，细胞在适当的培养条件下生长，当受到外界因素（如药物、辐射等）影响时，其代谢活动会发生变化。CCK-8试剂中的WST-8分子可以穿过细胞膜进入细胞内部，在细胞内的脱氢酶作用下被还原为黄色的甲臜物质。这种物质在特定波长下（通常为450 nm）具有较强的吸光度，可以通过分光光度计进行定量分析。
由于CCK-8试剂本身对细胞无毒，且不需要裂解细胞即可完成检测，因此该方法具有操作简便、重复性好、灵敏度高等优点。同时，CCK-8实验适用于多种细胞类型，包括肿瘤细胞、正常细胞以及干细胞等，广泛应用于药物筛选、细胞毒性研究、细胞增殖实验等领域。
值得注意的是，虽然CCK-8实验具有较高的准确性，但在实际操作中仍需注意一些关键因素，例如细胞接种密度、培养时间、试剂添加量及孵育条件等，这些都会直接影响实验结果的可靠性。此外，不同批次的CCK-8试剂可能存在微小差异，建议每次实验均使用同一批次产品以保证数据的一致性。
总之，CCK-8实验作为一种高效、便捷的细胞活性检测方法，已经成为生命科学研究中不可或缺的重要工具。通过对其原理的深入理解与合理应用，可以更准确地评估细胞状态，为相关研究提供有力支持。
